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本發(fā)明涉及一種提高CHO細(xì)胞重組蛋白表達(dá)水平的方法及其應(yīng)用，表達(dá)載體、表達(dá)系統(tǒng)及其制備方法，屬于基因工程技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明中的方法應(yīng)用CHO細(xì)胞內(nèi)源miRNAs與3′?UTR轉(zhuǎn)錄區(qū)互補結(jié)合來對篩選標(biāo)記基因表達(dá)進行負(fù)性調(diào)節(jié)，進而提高目的基因的表達(dá)量。將miRNAs與3′?UTR轉(zhuǎn)錄區(qū)克隆到篩選標(biāo)記基因的下游，構(gòu)建真核表達(dá)載體；然后將目的基因克隆到真核表達(dá)載體獲得重組表達(dá)載體，然后將其轉(zhuǎn)染細(xì)胞，獲得CHO細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)，實現(xiàn)目的基因的高效表達(dá)。本發(fā)明的CHO細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)，可以顯著提高目的基因在CHO細(xì)胞中的表達(dá)水平，實現(xiàn)目的蛋白在CHO細(xì)胞的高產(chǎn)量穩(wěn)定表達(dá)。

1、選定專利：顧問一對一服務(wù)，幫助買家選中所需專利，并確認(rèn)賣家專利可交易；

2、簽訂合同：買賣雙方與顧問協(xié)商交易細(xì)節(jié)，簽訂合同；

3、支付款項：買家依合同約定支付交易款項到運營平臺；

4、提供材料：買賣雙方需要提供《專利代理委托書》、《轉(zhuǎn)讓協(xié)議》、《解聘書》等材料給辦理轉(zhuǎn)讓手續(xù)方；

5、辦理手續(xù)：辦理轉(zhuǎn)讓手續(xù)方提交材料至國家知識產(chǎn)權(quán)局辦理轉(zhuǎn)讓手續(xù)，國家知識產(chǎn)權(quán)局最快半個月左右下發(fā)專利轉(zhuǎn)讓《手續(xù)合格通知書》；

6、證書交接：買家確認(rèn)收到《專利證書》、專利轉(zhuǎn)讓《手續(xù)合格通知書》原件，確認(rèn)無誤。

7、交易完成：平臺把交易款項支付給賣家，至此專利轉(zhuǎn)讓業(yè)務(wù)完成。

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