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本發(fā)明屬于基因工程及基因治療技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種高效人類及哺乳動物細(xì)胞附著體表達(dá)載體，同時還涉及該附著體表達(dá)載體的構(gòu)建方法和應(yīng)用。本發(fā)明在啟動子上游反向插入第一核基質(zhì)結(jié)合區(qū)序列，啟動子下游正向插入內(nèi)含子序列，內(nèi)含子序列下游正向插入第二核基質(zhì)結(jié)合序列，并進(jìn)一步優(yōu)選啟動子序列為EF?1α序列、第一核基質(zhì)結(jié)合區(qū)序列為MAR X?29、內(nèi)含子序列為hCMV內(nèi)含子序列、第二核基質(zhì)結(jié)合區(qū)序列為MAR特征性序列構(gòu)建形成附著體表達(dá)載體。通過實驗驗證，使用本發(fā)明構(gòu)建的表達(dá)載體，宿主細(xì)胞采用CHO細(xì)胞或人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116，能顯著提高轉(zhuǎn)基因表達(dá)水平與表達(dá)穩(wěn)定性，表達(dá)的目的蛋白具有生物學(xué)功能。

1、選定專利：顧問一對一服務(wù)，幫助買家選中所需專利，并確認(rèn)賣家專利可交易；

2、簽訂合同：買賣雙方與顧問協(xié)商交易細(xì)節(jié)，簽訂合同；

3、支付款項：買家依合同約定支付交易款項到運(yùn)營平臺；

4、提供材料：買賣雙方需要提供《專利代理委托書》、《轉(zhuǎn)讓協(xié)議》、《解聘書》等材料給辦理轉(zhuǎn)讓手續(xù)方；

5、辦理手續(xù)：辦理轉(zhuǎn)讓手續(xù)方提交材料至國家知識產(chǎn)權(quán)局辦理轉(zhuǎn)讓手續(xù)，國家知識產(chǎn)權(quán)局最快半個月左右下發(fā)專利轉(zhuǎn)讓《手續(xù)合格通知書》；

6、證書交接：買家確認(rèn)收到《專利證書》、專利轉(zhuǎn)讓《手續(xù)合格通知書》原件，確認(rèn)無誤。

7、交易完成：平臺把交易款項支付給賣家，至此專利轉(zhuǎn)讓業(yè)務(wù)完成。

保障一：對于在本平臺交易的交易品，均由我平臺驗證交易品的有效性；

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