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本發(fā)明涉及一種細(xì)胞系中食管癌功能基因敲除后增殖表型的快速鑒定方法，屬于分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明中的細(xì)胞系中食管癌功能基因敲除后增殖表型的快速鑒定方法，利用流式細(xì)胞分選儀，將200個(gè)帶有載體熒光標(biāo)簽的陽(yáng)性細(xì)胞群分選到96孔板的兩個(gè)孔中，培養(yǎng)0h后進(jìn)行片段分析（Fragment analysis，F(xiàn)A），可檢測(cè)到CRISPR?Cas9打靶該功能基因后目的基因座發(fā)生有效編輯的克隆；培養(yǎng)7天后，再次進(jìn)行片段分析，此時(shí)片段分析峰圖可根據(jù)不同細(xì)胞的增殖特性發(fā)生變化，其中增殖速度快的細(xì)胞出峰顯著，而增殖速度慢的細(xì)胞群則出峰不明顯，甚至不出峰；由此可快速判斷食管癌功能基因敲除后的增殖表型。

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